Prueba de fijación del complemento

Hay tres métodos de diagnóstico que se utilizan para identificar virus; las técnicas directa, indirecta y serológica. La prueba de fijación del complemento es una de las pruebas serológicas utilizadas en virología para identificar la presencia de anticuerpos o antígenos específicos. En este contexto, los complementos son proteínas en forma de serie dentro del suero del paciente que actúan en respuesta a un complejo de anticuerpo y antígeno. En caso de que la reacción tenga lugar en una membrana, se producen poros que dañan la célula.

Requerimientos:

• Complementos de cobaya producidos comercialmente

• Suero del paciente

• Glóbulos rojos preferiblemente de oveja

Procedimiento:

1. En la prueba de fijación del complemento, se extrae sangre venosa del paciente y se aísla el suero.

2. Es natural que los individuos difieran en la cantidad de complemento en suero. Con el fin de eliminar los efectos negativos que estos complementos pudieran tener sobre los resultados de la prueba, los complementos séricos se sustituyen por proteínas del complemento estandarizadas. Los complementos se destruyen por calentamiento, pero se cuida de preservar los anticuerpos. Esto se puede lograr porque los complementos son más vulnerables al calor que los anticuerpos. A partir de entonces, el área de complementos estándar se agrega al suero.

3. En el suero, se agregan los antígenos de interés y se incuba la preparación.

4. Se agregan glóbulos rojos a la preparación.

Resultados:

En la prueba de fijación del complemento, la incubación es necesaria ya que le da a los complementos un período para fijarse al complejo antígeno anticuerpo, es decir, si está presente. Si esto sucede, los complementos no estarán disponibles para actuar sobre los glóbulos rojos y causar hemólisis. Como resultado, una prueba positiva se designa por la presencia de glóbulos rojos. Las células se observan en el fondo del vaso de precipitados. Por el contrario, una prueba de fijación del complemento negativa está indicada por la lisis de los glóbulos rojos. Se observa el color rojo de la hemoglobina a medida que se esparce en el vaso debido a la lisis.

Prueba de antígenos:

Es una práctica común en serología realizar pruebas de anticuerpos en la prueba de fijación del complemento. Sin embargo, es factible realizar pruebas de antígenos. En este caso, el suero de prueba se complementa con anticuerpos que deben ser de naturaleza específica. Esto induce la formación de complemento.

Ventajas y desventajas:

La prueba es barata ya que no requiere equipos y reactivos costosos. Una vez más, se puede cribar un gran número de infecciones virales mediante la prueba de fijación del complemento. Sin embargo, debe tenerse en cuenta que la prueba requiere mucha mano de obra y, con frecuencia, no es específica.

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